HJ 897-2017 水质 叶绿素a的测定 分光光度法
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ID： |
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0.25 |
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8 |
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文件格式： |
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日期： |
2017-12-27 |
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中华人民共和国国家环境保护标准,HJ 897-2017,水质叶绿素a 的测定分光光度法,Water quality—Determination of chlorophyll a,—Spectrophotometric method,（发布稿）,本电子版为发布稿。请以中国环境出版社出版的正式标准文本为准,2017-12-21 发布2018-02-01 实施,环境保护部发布,i,目次,前言ii,1 适用范围.. 1,2 规范性引用文件1,3 方法原理.. 1,4 试剂和材料.1,5 仪器和设备.2,6 样品. 2,7 分析步骤.. 3,8 结果计算与表示4,9 精密度和准确度4,10 质量保证和质量控制..5,11 废物处理 5,ii,前言,为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护环境,保障人体健康，规范水中叶绿素a的测定方法，制定本标准,本标准规定了测定地表水中叶绿素a的分光光度法,本标准为首次发布,本标准由环境保护部环境监测司和科技标准司组织制订,本标准起草单位：辽宁省环境监测实验中心,本标准验证单位：上海市环境监测中心、大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、,辽阳市环境监测站、朝阳市环境监测中心站和辽宁北方环境检测技术有限公司,本标准环境保护部2017年12月21日批准,本标准自2018年2月1日起实施,本标准由环境保护部解释,1,水质叶绿素a的测定分光光度法,警告：丙酮对人体健康有一定危害，操作时应在通风橱中进行，佩戴防护器具，避免接,触皮肤和衣物,1 适用范围,本标准规定了测定水中叶绿素a 的分光光度法,本标准适用于地表水中叶绿素a 的测定,本标准测定丙酮提取液中叶绿素a 的检出限为0.04 mg/L。当取样体积为200 ml，丙酮,提取液体积为10 ml 时，本方法的检出限为2 μg/L，测定下限为8 μg/L,2 规范性引用文件,本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本,标准,GB/T 14581 水质湖泊和水库采样技术指导,HJ 494 水质采样技术指导,HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范,3 方法原理,将一定量样品用滤膜过滤截留藻类，研磨破碎藻类细胞，用丙酮溶液提取叶绿素，离心,分离后分别于750 nm、664 nm、647 nm 和630 nm 波长处测定提取液吸光度，根据公式计,算水中叶绿素a 的浓度,4 试剂和材料,除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的去离子,水或蒸馏水,4.1 丙酮（CH3COCH3）,4.2 碳酸镁（MgCO3）,4.3 丙酮溶液：9+1,在900 ml 丙酮（4.1）中加入100 ml 实验用水,4.4 碳酸镁悬浊液,称取1.0 g 碳酸镁（4.2），加入100 ml 实验用水，搅拌成悬浊液（使用前充分摇匀）,4.5 玻璃纤维滤膜：直径47 mm，孔径为0.45 μm～0.7 μm,2,5 仪器和设备,5.1 采样瓶：1 L 或500 ml 具磨口塞的棕色玻璃瓶,5.2 过滤装置：配真空泵和玻璃砂芯过滤装置,5.3 研磨装置：玻璃研钵或其他组织研磨器,5.4 离心机：相对离心力可达到1000 ×g（转速3000 r/min～4000 r/min）,5.5 玻璃刻度离心管：15 ml，旋盖材质不与丙酮反应,5.6 可见分光光度计：配10 mm 石英比色皿,5.7 针式滤器：0.45 μm 聚四氟乙烯有机相针式滤器,5.8 一般实验室常用仪器和设备,6 样品,6.1 样品采集,按照GB/T 14581、HJ/T 91 和HJ 494 中的相关规定进行样品的采集。样品的采集一般,使用有机玻璃采水器或其他适当的采样器采集水面下0.5 m 样品，湖泊、水库根据需要可进,行分层采样或混合采样，采样体积为1 L 或500 ml。如果样品中含沉降性固体（如泥沙等）,应将样品摇匀后倒入2 L 量筒，避光静置30 min，取水面下5 cm 样品，转移至采样瓶（5.1）,在每升样品中加入1 ml 碳酸镁悬浊液（4.4），以防止酸化引起色素溶解,注：如果水深不足0.5 m，在水深1/2 处采集样品，但不得混入水面漂浮物,6.2 样品保存,样品采集后应在0 ℃～4 ℃避光保存、运输，24 h 内运送至检测实验室过滤（若样品,24 h 内不能送达检测实验室，应现场过滤，滤膜避光冷冻运输），样品滤膜于-20 ℃避光保,存，14 d 内分析完毕,注：样品采集后，如条件允许，宜尽快分析完毕,6.3 试样的制备,6.3.1 过滤,在过滤装置（5.2）上装好玻璃纤维滤膜（4.5）。根据水体的营养状态确定取样体积，见,表1，用量筒量取一定体积的混匀样品，进行过滤，最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。过滤时,负压不超过50 kPa，在样品刚刚完全通过滤膜时结束抽滤，用镊子将滤膜取出，将有样品的,一面对折，用滤纸吸干滤膜水分,注：仅当富营养化水体的样品无法通过玻璃纤维滤膜时，可采用离心法浓缩样品，但转移过程中应保,证提取效率，避免叶绿素a 的损失及水分对丙酮溶液浓度的影响,3,表1 参考过滤样品体积,营养状态富营养中营养贫营养,过滤体积（ml） 100～200 500～1000,6.3.2 研磨,将样品滤膜放置于研磨装置（5.3）中，加入3 ml～4 ml 丙酮溶液（4.3），研磨至糊状,补加3 ml～4 ml 丙酮溶液（4.3），继续研磨，并重复1～2 次，保证充分研磨5 min 以上,将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管（5.5）中，用丙酮溶液（4.3）冲洗研钵……
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